
詳細介紹
| 品牌 | ProSpec | 供貨周期 | 現貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥,綜合 |
▍關于ProSpec
在生命科學研究的過程中,蛋白質既是研究的對象,也是推動實驗前行的核心工具。無論是免疫學實驗中需要的細胞因子、干細胞培養體系中依賴的生長因子,還是信號通路研究涉及的酶與抗原分子,研究人員每天都在與各類蛋白試劑打交道。而蛋白試劑的質量——純度、生物活性、批次穩定性、內毒素控制——往往直接決定了一個實驗能否重復、數據能否站得住腳。
ProSpec(ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.) 是一家源自以色列的生物技術企業,長期專注于重組蛋白及相關生物試劑的研發與生產。公司以蛋白質表達、折疊與純化技術為核心積累,面向科研界提供可用于實驗室研究用途的多種重組蛋白、天然蛋白、多肽及抗體產品,產品目錄覆蓋數以千計的不同分子條目,服務于腫瘤生物學、細胞凋亡、發育生物學、內分泌學研究、免疫學、神經科學、蛋白酶學、干細胞等多個研究方向。
與許多廣鋪產品線的綜合試劑商不同,ProSpec將精力集中在蛋白本身——如何讓重組表達的蛋白更接近天然構象、如何把純度提升到可供嚴謹實驗使用的水平、如何控制內毒素及其他雜質背景、以及如何讓產品在長途運輸與長期儲存后仍保持其生物活性。正是這種圍繞"蛋白質量"建立起來的專業路線,使其在科研蛋白供應領域形成了辨識度。
? 重要提示:ProSpec所有產品標注用途為 Laboratory Research Use Only,不可用于人體給藥、臨床診斷、農業農藥或食品添加等非研究用途。
?? 下圖為上海起發實驗試劑有限公司作為以色列ProSpec授權代理商的授權書

▍核心優勢
① 蛋白純度與生物活性的質量控制體系
ProSpec重組蛋白產品在出廠前會經歷多步驟的表達優化、柱層析純化及質量檢測流程。多數重組蛋白產品的純度通過SDS-PAGE檢測可達到 95%以上,并且會對生物活性進行功能性驗證(例如細胞因子通過對應的細胞系應答實驗測定EC??范圍)。對于免疫學、細胞信號轉導等對雜質背景敏感的實驗而言,這一質控維度具有實際意義。
此外,ProSpec在內毒素控制方面設有對應檢測環節。低內毒素背景對于涉及免疫細胞培養、T細胞/NK細胞功能實驗的場景尤為重要——因為外源性內毒素本身即可激活免疫細胞,從而干擾實驗結果。
② 表達系統選擇:細菌來源與真核表達并行
ProSpec的一個顯著特點是其長期以來在細菌來源重組蛋白(如E.coli表達系統)方面的生產能力。E.coli系統經濟、表達量高,適合大量蛋白的生產;但某些需要糖基化或復雜二硫鍵折疊的哺乳動物蛋白,則需要在真核表達系統中完成。為此,ProSpec也提供來源于昆蟲細胞(Sf9)及哺乳動物細胞(HEK293等)表達體系的重組蛋白產品。
這種多表達平臺并行的策略,意味著研究人員可以根據自己實驗的具體需求——是需要高性價比的基礎活性蛋白,還是需要更接近天然糖基化形式的分子——來選擇合適的表達來源版本。
③ 配方簡潔:少添加劑、低鹽凍干
不少商業化蛋白產品為了增加凍干過程中的穩定性,會在制劑中加入載體蛋白(如BSA、HSA)或糖類保護劑(如蔗糖),這些添加成分雖然有利于蛋白存續,卻也可能引入額外背景信號——尤其在需要精確濃度計算、需要偶聯標記、或進行表面包被的實驗(如ELISA包被、流式染色緩沖液配制)中造成干擾。
ProSpec的許多產品采用低鹽溶液凍干的方式進行處理,不含載體蛋白或其他穩定劑添加,使研究者拿到的是更"干凈"的蛋白粉末,可根據自己的緩沖體系和實驗設計靈活重溶。當然,這也意味著重溶后的短期保存需要遵循更規范的操作(使用含低濃度載體蛋白的緩沖液、避免反復凍融等),這部分在使用方法中會詳細說明。
④ 產品廣度:覆蓋多類功能蛋白分子
目前ProSpec可提供數千種重組蛋白及關聯抗體產品,涵蓋:
• 細胞因子(干擾素家族、白細胞介素家族、TNF超家族成員、TGF-β超家族成員等)
• 生長因子(FGF家族、EGF家族、PDGF家族、VEGF家族、IGF家族、神經生長因子等)
• 趨化因子(CC趨化因子亞家族、CXC趨化因子亞家族、XCL/CX3CL亞家族等)
• CD抗原(免疫細胞表面分子胞外段重組形式)
• 神經營養因子(BDNF、NGF、GDNF、CNTF等)
• 激素(瘦素、促卵泡激素相關肽段、生長激素釋放相關肽、GLP類似肽段等)
• 酶與酶相關蛋白(ACE2、碳酸酐酶、腺ylate kinase、MMP系列等)
• 病毒抗原重組蛋白(用于病毒學研究及抗體篩選背景)
• 天然提取蛋白及重組結構蛋白
這種"一站目錄"的特性,使得同一個實驗室的不同課題組——甚至同一課題組的多種方向——都能在同一品牌體系內找到對應試劑。
⑤ 供應鏈路:中國地區由上海起發實驗試劑有限公司代理服務
在中國市場,上海起發實驗試劑有限公司作為ProSpec的授權代理商,為國內科研機構、高校實驗室及企業研發部門提供產品咨詢、訂貨、進口清關、物流跟蹤及售后溝通等服務。對于國內用戶而言,這意味著從詢價到收貨的全鏈路有一個本土對接窗口,可減少跨國采購中常見的溝通延遲與信息不對稱。
▍熱門產品介紹
一、細胞因子系列
細胞因子是一類由免疫細胞及其他細胞分泌的小分子蛋白(多為糖蛋白),通過結合靶細胞膜上的特異性受體來調節免疫應答、炎癥反應、細胞增殖與分化等多種生理與病理過程。ProSpec的細胞因子產品線是該品牌的核心組成。
(1)重組干擾素-γ(Recombinant Human IFN-γ)
? 產品特點
重組人IFN-γ通常由HEK293或E.coli表達系統重組表達后經純化獲得,為同源二聚體糖蛋白(真核表達版本含N-糖基化)。凍干粉末形態,純度經SDS-PAGE檢測一般可達95%以上,內毒素水平經控制。生物活性通過基于TH1型免疫應答的細胞報告系統(如刺激巨噬細胞/單核細胞系產生NO或相關標志物,或通過T細胞/NK細胞系的IFN-γ下游信號放大測定)進行驗證。
? 存儲條件
• 未開封(凍干態):應避濕、避光,存放于 -18°C以下(部分產品可在室溫短期耐受數周,但長期儲存儲薦低溫干燥環境)。
• 重溶后:建議分裝,短期(2–7天)可存于 4°C,長期應存于 -18°C至-80°C,避免反復凍融;如需延長液態保存期,可在重溶緩沖液中加入0.1% endotoxin-free BSA或HSA作為載體蛋白穩定劑。
? 工作原理
IFN-γ屬于II型干擾素,主要效應是激活巨噬細胞、增強MHC I/MHC II分子表達、促進Th1型免疫偏移、并上調多種固有免疫與適應性免疫相關基因的表達。其通過結合由IFN-γR1/R2組成的異二聚體受體,激活JAK-STAT1信號通路(典型為STAT1的Tyr701磷酸化),從而驅動IRF1等轉錄因子介導的基因程序。
? 使用方法概要
1. 離心凍干粉管片刻(勿直接渦旋凍干餅),按標示重溶體積以無菌PBS(pH 7.2–7.4)或含極少量載體蛋白的緩沖液緩慢沿管壁加入;
2. 輕輕吹打混勻,避免劇烈震蕩產生泡沫;
3. 按實驗所需終濃度(常見工作范圍依細胞類型而定,多處于 0.1–10 ng/mL量級,具體以預實驗滴定為準)稀釋入培養基;
4. 若做長期儲存,立即分裝(每管單次用量),標記濃度與日期,存入低溫冰箱。
(2)重組白細胞介素-2(Recombinant Human IL-2)
? 產品特點
IL-2是最早被克隆并廣泛用于免疫細胞操作的人源細胞因子之一,能夠促進T細胞(尤其是CD8? cytotoxic T cell與NK細胞)的增殖與活化。ProSpec提供的重組人IL-2為凍干形態,經純化處理,純度與活性經質檢。不含多余載體蛋白的版本可使研究者自行決定重溶體系。
? 存儲條件
凍干態同上述低溫干燥避光儲存原則;重溶后需格外注意避免反復凍融與過度稀釋(IL-2在低濃度蛋白環境中容易貼壁損失),因此重溶時建議使用含低濃度BSA的緩沖液,并盡快分裝凍存。
? 工作原理
IL-2通過與T細胞表面的高親和力IL-2受體(由IL-2Rα/CD25、IL-2Rβ/CD122、IL-2Rγ/γc組成)結合,激活JAK1/JAK3–STAT5信號軸,驅動cyclin D/E表達上調,推動T細胞從G1進入S期,實現增殖擴增。其在免疫學實驗中被廣泛用于:外周血單個核細胞(PBMC)中T細胞擴增、NK細胞活化培養、以及CAR-T相關基礎研究中的細胞因子補充體系。
? 使用方法概要
1. 無菌條件下重溶,推薦重溶緩沖液為含 0.1%–0.5% BSA的無菌PBS;
2. 使用濃度需依據細胞體系優化(文獻常見范圍為 10–200 IU/mL或等效質量濃度,但不同批次細胞的最佳值可能漂移,建議做劑量響應曲線);
3. 加入培養基后輕柔混勻,培養過程中注意每2–3天半量換液并補加IL-2以維持有效濃度。
(3)重組白細胞介素-6(Recombinant Human IL-6)
? 產品特點
IL-6是一種多效性細胞因子,參與急性期反應、B細胞分化、Th17譜系偏移等過程。ProSpec重組人IL-6為凍干粉末,可提供E.coli來源或HEK來源兩種表達版本(后者為糖基化形式)。經SDS-PAGE及活性檢測放行。
? 存儲條件
同上通用原則:凍干態-18°C以下干燥避光;重溶后4°C短期,長期-80°C分裝;避免反復凍融。
? 工作原理
IL-6先與膜受體IL-6Rα結合,再招募gp130形成信號復合物,激活JAK–STAT3(經典通路)、MAPK及PI3K/Akt等旁路,促進下游基因表達。由于其信號強度與濃度依賴關系明顯,實驗設計中需要設置濃度梯度與對照(尤其是涉及炎癥模型——如肝細胞急性期蛋白誘導、或少突膠質細胞/神經細胞培養的背景炎癥調控時)。
? 使用方法概要
1. 無菌PBS(可選含微量BSA)重溶,輕柔混勻;
2. 通常工作濃度在 1–50 ng/mL范圍(需根據靶細胞的IL-6反應性預滴定);
3. 在涉及多因子組合培養時,注意IL-6與可溶性IL-6Rα的協同效應(某些實驗體系會故意加入sIL-6Rα以模擬反式信號)。
(4)重組人腫瘤壞死因子-α(Recombinant Human TNF-α)
? 產品特點
TNF-α是TNF超家族的核心促炎因子,以三聚體形式結合TNFR1/TNFR2,觸發NF-κB與凋亡信號(如caspase-8依賴途徑)。ProSpec重組人TNF-α為活性構象凍干制品,三聚體形式在正確折疊條件下保留生物活性。
? 存儲條件
凍干態低溫干燥避光;重溶后含微量BSA的緩沖液有助于穩定,分裝-80°C保存。
? 工作原理
TNF-α與受體結合后通過TRADD/RIP/FADD適配子組裝信號復合體,一方面通過IKK–IκB–NF-κB推動炎癥基因轉錄,另一方面在特定條件下(如蛋白合成抑制狀態下)偏向凋亡復合體形成。實驗中常用于:誘導腫瘤細胞系凋亡/壞死檢查、構建炎癥刺激模型、激活NF-κB報告系統。
? 使用方法概要
1. 重溶時使用無菌PBS或含0.1%BSA的PBS;
2. 工作濃度范圍跨度大(依細胞系敏感性差異顯著),常見為 0.1–20 ng/mL;
3. 注意:TNF-α對部分正常細胞也有毒性,處理時間窗口與濃度需嚴格記錄;對照組應包含等體積緩沖液空白。
二、生長因子系列
(1)重組表皮生長因子(Recombinant Human EGF)
? 產品特點
EGF通過與EGFR(ErbB1/HER1)結合促進上皮細胞、成纖維細胞等多種細胞的增殖與存活。ProSpec重組人EGF為凍干形態,分子量約6 kDa,純度經SDS-PAGE驗證。適用于細胞培養補充、信號通路激活實驗。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下;重溶后短期4°C(1–3天),長期-80°C分裝,含微量BSA可提升液態穩定性。
? 工作原理
EGF結合EGFR胞外段→受體二聚化→胞內酪酸激酶自磷酸化→激活RAS–RAF–MEK–ERK與PI3K–Akt等通路→調控細胞周期蛋白表達與存活信號。
? 使用方法概要
1. 無菌PBS(含0.1%BSA可選)重溶;
2. 常見培養補充終濃度為 1–10 ng/mL(依細胞系而定);
3. 培養基中半衰期受溫度與蛋白酶降解影響,通常每48–72小時補加或換液。
(2)重組人堿性纖維細胞生長因子(Recombinant Human bFGF / FGF-2)
? 產品特點
bFGF(FGF-2)是多能因子,參與胚胎發育、血管生成、干細胞自我更新維持等過程。因bFGF分子量?。s17–18 kDa)、缺乏信號肽的分泌途徑、且易貼壁吸附,對緩沖液配方與載體蛋白的存在較為敏感。ProSpec提供的重組人bFGF為純化凍干制品,適用于干細胞培養體系(如人多能干細胞未分化維持中的bFGF+培養基體系)及血管生成相關體外實驗。
? 存儲條件
關鍵提醒:bFGF在低濃度水溶液中極易在管壁吸附損失。重溶時必須使用含 0.1%–0.5% BSA或類似惰性蛋白的緩沖液。凍干原瓶保存于-18°C以下;重溶后分裝-80°C,避免凍融。
? 工作原理
bFGF通過結合FGFR(需硫酸肝素/肝素輔因子參與),引發受體二聚化與酪酸磷酸化,激活下游MAPK/ERK與PI3K/Akt通路,維持細胞增殖與多能性相關轉錄網絡。
? 使用方法概要
1. 重溶緩沖液推薦:無菌PBS + 0.1%–0.5% BSA + 適量肝素(如適用;部分培養體系含肝素或Matrigel/基底膜提取物已提供硫酸肝素背景);
2. 工作濃度依用途差異大:干細胞維持常見 4–100 ng/mL范圍;需按具體培養基配方與細胞株響應做滴定;
3. 一旦加入含血清的培養基(血清中含bFGF結合蛋白與蛋白酶),有效濃度會隨時間衰減——需要規劃好補液/換液頻率。
(3)重組人血管內皮生長因子(Recombinant Human VEGF)
? 產品特點
VEGF是血管生成的核心調控因子,主要作用于VEGFR-2(KDR/Flk-1)介導的內皮細胞增殖、遷移與管腔形成。ProSpec提供不同剪接變體版本(如VEGF???、VEGF???等來源的重組形式),凍干粉末,純度可控。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下干燥避光;重溶后以含微量BSA的緩沖液分裝,-80°C保存,避免反復凍融。
? 工作原理
VEGF以同型二聚體結合內皮細胞表面VEGFR-2 → 激活PLCγ–PKC、PI3K–Akt、RAS–MAPK等通路 → 促進內皮存活、增殖與趨化。體外常用于:HUVEC(人臍靜脈內皮細胞)成管實驗(tube formation assay)、雞胚絨毛尿囊膜(CAM)背景研究、以及腫瘤微環境血管生成相關共培養模型。
? 使用方法概要
1. 無菌PBS+0.1%BSA重溶;
2. 體外成管實驗典型刺激濃度約為 10–50 ng/mL(需預滴定;Matrigel上HUVEC接種密度與VEGF梯度的匹配關系影響成管分支密度);
3. 實驗終點讀取應在固定時間窗內統一處理,避免主觀選取時間點造成的偏差。
(4)重組胰島素樣生長因子-1(Recombinant Human IGF-1)
? 產品特點
IGF-1在組織生長、代謝調控與某些腫瘤增殖中發揮作用,受體為IGF-1R(RTK類)。ProSpec重組人IGF-1為凍干純化制品,可用于細胞增殖/存活檢測、信號通路交叉對話(與胰島素受體/IR及IGF-1R雜合受體)等研究。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下;重溶后含微量BSA分裝-80°C。
? 工作原理
IGF-1結合IGF-1R→自磷酸化→IRS適配蛋白→PI3K–Akt(存活/代謝)與RAS–ERK(增殖)→調控下游。
? 使用方法概要
1. 重溶于含0.1%BSA的無菌PBS;
2. 工作濃度常見 1–100 ng/mL(依細胞類型差異大);
3. 在含血清培養基中需注意:胎牛血清中含內源性IGF結合蛋白(IGFBPs)可能影響自由IGF-1的有效濃度——如需精確控制,可選擇無血清限定培養基體系或加入過量BSA競爭結合。
三、趨化因子系列
(1)重組人RANTES/CCL5(Recombinant Human RANTES / CCL5)
? 產品特點
CCL5(RANTES)是CC趨化因子亞家族成員,可由活化T細胞、血小板、內皮細胞等分泌,招募CCR1/CCR3/CCR5陽性免疫細胞(記憶T細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞等),在HIV共受體機制研究與炎癥細胞浸潤模型中頻繁出現。ProSpec提供的重組人RANTES為凍干純化形式。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下低溫干燥;重溶后含微量BSA的分裝-80°C。
? 工作原理
CCL5通過CCR1/CCR3/CCR5觸發G蛋白偶聯受體信號(Ca2? flux、整合素活化、細胞骨架重組),引導細胞定向趨化遷移。體外常用于:transwell遷移/侵襲實驗、鈣離子成像、流式檢測活化表型(如β1/β2整合素上調)。
? 使用方法概要
1. 無菌PBS+0.1%BSA重溶;
2. transwell下室趨化濃度通常 10–200 ng/mL(需針對細胞類型滴定優梯度);
3. 實驗需設置陰性對照(下室僅含緩沖液)與陽性參照(如SDF-1α/CCL19等平行趨化體系)以排除非特異性運動。
(2)重組人SDF-1α / CXCL12(Recombinant Human SDF-1α / CXCL12)
? 產品特點
CXCL12(SDF-1α)是骨髓/組織基質微環境中關鍵的穩態趨化因子,受體為CXCR4(亦可與CXCR7結合),在造血干細胞歸巢、腫瘤細胞轉移趨向、免疫細胞定位中發揮核心作用。ProSpec重組人SDF-1α為凍干純化制品。
? 存儲條件
同趨化因子通用原則:凍干態低溫避光;重溶后微量BSA穩定、分裝-80°C、避免凍融。
? 工作原理
CXCL12–CXCR4軸通過Gi蛋白信號降低cAMP、開放Ca2?通道、活化PI3K–Akt與FAK黏附信號,驅動細胞極化與定向遷移。此軸也是AMD3100(plerixafor)等藥物的作用靶點背景,常用于造血干/祖細胞動員相關研究。
? 使用方法概要
1. 重溶于含0.1%BSA的無菌PBS;
2. 趨化實驗常用 50–500 ng/mL下室濃度(視細胞系與孔徑大小調整);
3. 上室細胞鋪板前需血清饑餓(常用0.1%–0.5% BSA培養基,2–4 h),以消除血清中混雜趨化背景干擾。
四、神經營養因子系列
重組人BDNF(Recombinant Human Brain-Derived Neurotrophic Factor)
? 產品特點
BDNF是NGF家族成員,通過TrkB受體促進神經元存活、突觸可塑性與分化。ProSpec重組人BDNF為活性構象凍干制品(真核表達版本更接近天然折疊)。因其易被管壁吸附且對聚集敏感,操作要求較一般細胞因子更細致。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下干燥避光。重溶必須使用含carrier protein的緩沖液(如PBS+0.1%BSA),分裝-80°C,嚴控凍融次數(建議≤2次)。
? 工作原理
BDNF結合TrkB→自磷酸化→PI3K–Akt(存活)、MAPK–ERK(分化/可塑性)、PLCγ–IP?/DAG(Ca2?信號)→調控CREB等轉錄因子→神經營養效應。
? 使用方法概要
1. 重溶緩沖液:無菌PBS + 0.1%–1% BSA(部分方案推薦含少量還原劑如0.5 mM DTT,但需依具體實驗評估氧化還原對下游受體結合的影響);
2. 工作濃度依體系:原代神經元培養常用 10–50 ng/mL;細胞系過表達TrkB者可按滴定確定;
3. 培養基中加入后每48 h半量換液補加,避免蛋白持續降解導致有效濃度不可控。
五、激素與肽類系列
重組人瘦素(Recombinant Human Leptin)
? 產品特點
瘦素是由脂肪組織分泌的激素樣信號蛋白,作用于下丘腦及外周組織的Ob-R(LEPR)調節食欲、能量代謝與部分免疫調節作用。ProSpec重組人瘦素為凍干純化形式,可用于代謝研究方向(細胞水平的瘦素信號激活、STAT3磷酸化檢測等)。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下;重溶后含微量BSA分裝-80°C。
? 工作原理
瘦素–Ob-R→JAK2磷酸化→STAT3(Tyr705)轉位入核調控POMC/NPY等靶基因;同時可激活MAPK與PI3K旁路。
? 使用方法概要
1. 無菌PBS+0.1%BSA重溶;
2. 體外刺激濃度參考范圍 0.1–10 nM(約1–100 ng/mL量級,需依細胞模型的瘦素受體表達量預滴定);
3. 檢測指標建議包含p-STAT3 (Tyr705) 的Western或ICC,以及下游SOCS3反饋轉錄作為內參驗證。
六、酶與相關功能蛋白
重組人ACE2(Recombinant Human Angiotensin-Converting Enzyme 2)
? 產品特點
ACE2是腎素-血管緊張素系統(RAS)的關鍵負調控元件,也是冠狀病毒屬某些病毒的宿主細胞進入受體。ProSpec提供的重組人ACE2為純化蛋白(常見為胞外段或全長可溶形式,具體依產品條目而定),凍干態,可用于結合研究、競爭性抑制實驗或作為檢測體系中的靶標蛋白。
? 存儲條件
凍干態-18°C以下干燥避光;重溶后含微量穩定劑的緩沖液分裝-80°C。
? 工作原理
ACE2水解Ang II生成Ang (1-7),具有血管保護效應;在與病毒刺突蛋白結合場景中以酶-配體物理相互作用介導膜融合進入。體外用途取決于實驗設計:可作為包被抗原/競爭靶標用于抗體篩選背景,也可用于酶活檢測體系(底strate cleavage→熒光/顯色讀數)。
? 使用方法概要
1. 按說明書推薦緩沖液重溶(常為pH 7.4 Tris或PBS體系,可含微量甘油或BSA);
2. 若用于包被ELISA板:用包被緩沖液(pH 9.6)稀釋至 0.5–2 µg/mL,4°C過夜包被,后續封閉(常用BSA或脫脂奶封閉);
3. 若用于酶活檢測:需配置對應底strate(如熒光肽底strate)并在適宜pH/離子強度下讀取動力學曲線。
▍ProSpec蛋白試劑解決實驗中的哪些問題
在實際科研操作中,研究人員在選擇蛋白試劑時常遇到以下幾類痛點,而ProSpec的產品設計與質控思路正是圍繞這些痛點展開的:
① 蛋白活性不足 → 實驗無響應或信號微弱
某些低價或粗提蛋白制品因折疊錯誤、聚集或部分降解,導致與受體結合效率低下,表現為即使加大用量也無法得到預期的細胞應答。ProSpec通過表達系統選擇(對需要糖基化的分子使用真核表達)+ 多級純化 + 活性功能驗證,使產品在使用者手中更容易復現文獻中的預期效果。
② 雜質背景(內毒素/雜蛋白)干擾 → 免疫細胞"被激活了"但不是你要的信號
尤其在原代免疫細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、T細胞等體系中,哪怕微量的內毒素污染都足以觸發TLR4通路,產生看似"因子起作用了"的假陽性。ProSpec在純化流程中納入內毒素去除與檢測環節,降低這種非特異性背景帶來的數據噪音。
③ 添加劑太多 → 下游應用受干擾
如前所述,不含BSA/HSA等載體蛋白的制劑選項,讓使用者在做表面包被、偶聯標記、定量比對、質譜樣品制備等精細操作時,不必額外花步驟去"洗掉"保護劑背景。
④ 批次間波動大 → 好不容易做出來的趨勢無法重復
ProSpec通過標準化表達發酵與層析純化流程、輔以純度/活性/內毒素等多項放行檢測,減小不同批號間的功能漂移幅度,幫助實驗室在長期項目中維持試劑一致性。
⑤ 小包裝需求 vs 大包裝浪費
許多研發實驗室的項目處于探索階段,不需要一次性購入大毫克級蛋白(且多數小眾因子用量本就微克級)。ProSpec的產品以小規格(常見2 µg、5 µg、10 µg、20 µg等級別)為主流,適配科研項目"多品種、小用量"的采購特征。
▍購買ProSpec產品:常見問題與解答
Q1:ProSpec的產品是天然提取的還是重組表達的?
A:絕大多數為重組表達蛋白(通過E.coli、Sf9昆蟲細胞或HEK293哺乳動物細胞表達系統生產后純化),另有少量天然提取蛋白條目。在產品頁面/說明中會標注表達來源(Source),選購時可根據實驗對糖基化/翻譯后修飾的要求來判斷選哪個來源版本。
Q2:為什么收到的瓶子看起來是"空的"或只有微量白色粉末?
A:ProSpec多數產品以凍干粉末形式提供,蛋白量通常在微克級別,視覺上就是瓶底一層極薄的白色至淡米色痕跡,這是正常的。請勿以"肉眼可見多少粉"來判斷含量,應以說明書標注的蛋白質量(µg)與重溶體積來計算濃度。
Q3:重溶時用什么緩沖液?能用超純水直接溶嗎?
A:不建議用純水。多數蛋白在低離子強度純水中可能因靜電排斥或局部pH漂移而變性/聚集。推薦使用無菌pH 7.2–7.4的PBS;對某些易吸附或易聚集的蛋白(bFGF、BDNF、多數趨化因子),應在PBS中預先加入 0.1%–0.5% endotoxin-free BSA,以保護蛋白穩定性。
Q4:重溶后一次用不完怎么辦?
A:務必分裝(aliquot)后低溫保存。原則是:預計單次使用量 × N管分裝 → 存入-80°C(或至少-20°C深冷)。每次實驗取出一管,用后剩余不再回收。這是避免反復凍融導致聚集失活的基本操作紀律。
Q5:可以過濾除菌嗎?
A:蛋白溶液不宜直接用0.22 µm濾ter盲目過濾——因為蛋白會被濾膜吸附而造成顯著濃度損失(尤其低濃度時損失比例驚人)。正確做法:從凍干瓶重溶開始就在無菌條件下操作(超凈臺、無菌緩沖液、無菌分裝管),而非事后過濾"消毒"。如對無菌性有疑慮,應提前規劃好緩沖液高壓/過濾與容器滅菌流程。
Q6:產品說明寫了"for laboratory research use only",具體什么意思?
A:意思是該產品僅限非臨床、非診斷、非治療的科學研究用途。不得用于人體給藥、不得作為藥物成分、不得用于食品添加劑或農業用途。采購與使用方需確保使用場景合規。
Q7:不同表達來源(E.coli vs HEK vs Sf9)該怎么選?
A:簡單判斷框架——
• 如果你的實驗只關心功能性受體結合/細胞應答,且該分子不需要糖基化就能起效 → E.coli版本通常更經濟;
• 如果需要更接近天然的人類糖基化譜(如某些抗體識別表位依賴糖鏈、或受體結合對折疊/糖基化敏感)→ 選HEK(哺乳動物)或Sf9(昆蟲)表達版本;
• 若你做的是種屬交叉實驗(如用人因子刺激小鼠細胞),還要核對種屬同源性——有時人源蛋白對鼠受體交叉激活弱,可能需要改用對應種屬重組版本。
Q8:怎么確認某個具體蛋白在我實驗中的合適工作濃度?
A:ProSpec產品文檔中通常會給出一個活性測定方法學與EC??參考值(如"EC?? = 0.5 ng/mL in XX cell-based assay"),這只是該檢測體系下的參考,不能直接等同于你的細胞系/原代細胞的理想終濃度。穩妥做法是:用2–3個對數間隔的濃度(例如0.1 / 1 / 10 / 50 ng/mL)做一個小矩陣預實驗,用你的讀out(Western p-STAT、qPCR靶基因、細胞計數或報告基因)確認線性窗口后再鎖定主實驗條件。
Q9:在中國如何訂購?貨期大概多久?
A:國內可通過上海起發實驗試劑有限公司(ProSpec 授權代理商)進行產品查詢、報價與訂購。貨期取決于具體條目的庫存狀態(以色列母庫發貨 vs 國內現貨),請在詢價時同步確認預計到貨時間并預留采購提前量,以免因試劑在途影響已排定的實驗計劃。
Q10:收到貨后發現瓶內真空塞松動/凍干餅碎裂/標簽信息疑問,怎么處理?
A:先拍照留存產品狀態與標簽信息,然后聯系上海起發實驗試劑有限公司的對接人員,提供產品名稱、批號(Lot No.)與到貨情況描述,由代理方與品牌方核實是否為運輸途中正常氣壓變化導致的塞子微彈起(這在凍干制品跨國運輸中偶爾出現),再確定是否需要進一步處理。切勿在存疑狀態下直接大量重溶投入主實驗。
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(注:本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)
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